檢測原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被生長激素（GH）抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中抗生長激素抗體IgG（Anti-GH IgG）的存在與否。

操作步驟：人抗生長激素抗體IgGELISA試劑盒 定性分析

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；

3.  待測樣本孔加待測樣本10μl，稀釋液40μL；

4.  隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗原100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

人抗生長激素抗體IgGELISA試劑盒 定性分析結(jié)果判斷：

1.  試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；

陰性對照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性

ELISA試劑盒的使用過程中常見的問題有很多。如：加樣器不正 確、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范等等對檢測結(jié)果影響極大。我司為您準(zhǔn)備了以下解決問題的方法：

1.     樣品加樣時要仔細(xì)，以防漏加錯加。加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集在孔底，從而導(dǎo)致非特異性吸附。

2.     每次洗滌時應(yīng)靜止30秒，選用吸水紙作為襯墊，洗滌后甩干孔內(nèi)水分 。

3.     消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4.     在儲存和溫育時應(yīng)避免強(qiáng)光直射。

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