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豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒 定性
簡(jiǎn)要描述：軒澤康生物提供豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒 定性免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，快速檢測(cè)一周內(nèi)出結(jié)果。我司ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品種類齊全，為您提供全面技術(shù)咨詢服務(wù)和產(chǎn)品說(shuō)明書。試劑盒有質(zhì)量問(wèn)題我們無(wú)條件退換。歡迎咨詢、訂購(gòu)!
更新日期：2024-11-18- 訪 問(wèn) 量：541
產(chǎn)品介紹
| 品牌 | 軒澤康 | 規(guī)格 | 96T,48T |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 | 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
| 保存條件 | 2-8℃ | 檢測(cè)方法 | 雙抗一步夾心法 |
| 實(shí)驗(yàn)儀器 | 酶標(biāo)儀 | 樣本類型 | 血清、血漿、細(xì)胞上清液等 |
| 特色服務(wù) | 免費(fèi)代測(cè) |
豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒 定性常見(jiàn)樣本處理及要求：
【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過(guò)夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：收集血液樣本應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞在溶解時(shí)會(huì)釋放具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中將會(huì)出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。另外，樣本還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榧?xì)菌可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。
【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：檢測(cè)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書，查看該試劑盒針對(duì)抗凝劑是否有特殊要求。
【細(xì)胞培養(yǎng)物上清】：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
【樣品保存】：樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），避免反復(fù)凍融，標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被肺炎支原體（MP）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUT OFF值相比較，從而判定標(biāo)本中肺炎支原體抗原（MP-Ag）的存在與否。
豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒 定性組成及其配置：
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 品牌 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 軒澤康 |
陰性對(duì)照 | 0.5mL | 軒澤康 | 軒澤康 |
陽(yáng)性對(duì)照 | 0.5mL | 0.5mL | 軒澤康 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 軒澤康 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 軒澤康 |
底物B | 6mL | 3mL | 軒澤康 |
終止液 | 6mL | 3mL | 軒澤康 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 軒澤康 |
說(shuō)明書 | 1份 | 1份 | 軒澤康 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 軒澤康 |
操作步驟：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL；
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加稀釋液40μL；
4. 隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題解答：
1. 問(wèn)：96T可以檢測(cè)多少個(gè)樣本？48T可以檢測(cè)多少個(gè)樣本？
上海軒澤康生物解答：96T ELISA試劑盒可檢測(cè)90個(gè)樣本，留6個(gè)孔做標(biāo)準(zhǔn)曲線；48T ELISA試劑盒可檢測(cè)42個(gè)樣本。
2. 問(wèn)：能否使用自己的稀釋液或者緩沖液？
上海軒澤康生物解答：每個(gè)試劑盒中都含有按配方配置的與特異性樣品種屬相配套的稀釋液，以確保待檢測(cè)的樣品被正確稀釋。具體請(qǐng)參看說(shuō)明書
3. 問(wèn)：ELISA檢測(cè)試劑盒空白對(duì)照是什么意思？
上海軒澤康生物答：不加樣本，不加稀釋液，不加酶標(biāo)試劑。其他都可以加。
4. 問(wèn)：我是按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行測(cè)定的但是沒(méi)有任何信號(hào)，這是為什么？
上海軒澤康生物答： 對(duì)于使用HRP底物的比色測(cè)定，終止液的加入會(huì)使底物變色。而說(shuō)明書推薦的波長(zhǎng)就是最適波長(zhǎng)。通過(guò)輕拍酶標(biāo)板的邊緣充分混合孔內(nèi)試劑，加入終止液時(shí)顏色由藍(lán)變黃。如果加終止液之前孔內(nèi)試劑沒(méi)有混合，則底物顏色變綠。也可能加入試劑的順序錯(cuò)誤。加入底物溶液以后不要清洗酶標(biāo)板，在連續(xù)稀釋時(shí)確定已經(jīng)加入標(biāo)準(zhǔn)品。如果底物系統(tǒng)中有兩個(gè)成份必須混合均勻。同時(shí)需確保酶標(biāo)儀的使用和操作正確。確定試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品都正確配置并按照說(shuō)明滴加無(wú)誤。
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