檢測前準備工作：

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

豬細小病毒抗原(PPV-Ag)ELISA試劑盒 定性組成及其配置：

豬細小病毒抗原(PPV-Ag)ELISA試劑盒 定性性能：

1.  準確性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；陰性對照孔OD值平均值≤0.15，說明試驗結(jié)果有效。

2.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

3.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

實驗中問題解答：

【檢測的結(jié)果沒有吸光度值或吸光度值很低】

可能造成的原因：1.使用的試劑盒已過有效期 2. 沒有充分回溫、孵育的溫度太低

上海軒澤康生物為您解答：建議更換有效期以內(nèi)的試劑盒，使用同一批次試劑盒內(nèi)的內(nèi)容物并嚴格按照說明書步驟進行操作。在實驗操作的整個過程中仔細觀察恒溫箱的溫度。

【吸光度值偏高】

可能造成的原因：孵育溫度過高，反應(yīng)時間過長。

上海軒澤康生物為您解答：建議調(diào)整孵育環(huán)境的溫度，如無法調(diào)整室內(nèi)溫度請將顯色時間適當(dāng)縮短，控制反應(yīng)時間。

【陰性樣本的吸光度值低】

可能造成的原因：酶標板孔中的試劑未充分的混和

上海軒澤康生物為您解答：注意操作的方法，注意洗滌時的方法。

【標準曲線的線性不好，雙孔對照孔的OD值差別很大，出現(xiàn)跳孔現(xiàn)象】

可能造成的原因：酶標孔間相互污染，洗板后未能盡快進行下一步驟、添加樣品或其他試劑時操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā)

上海軒澤康生物為您解答：加樣時請小心勿將液體濺入另一孔中。洗板后及時進行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入，勿將槍頭接觸到板孔內(nèi)。確認孵育環(huán)境不透光，蓋板膜將酶標板密封好，使用已經(jīng)校正過的微量加樣器。

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